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原載自：diomay.cn[技術(shù)資料頻道] 2017-01-11 瀏覽次數(shù)：1965

　　培養(yǎng)ATCC細(xì)胞的生存環(huán)境是培養(yǎng)瓶、器皿或其他容器，生存空間及營養(yǎng)是有限的。當(dāng)細(xì)胞增殖到一定密度后，分離出一部分細(xì)胞和更新營養(yǎng)液，使細(xì)胞更好地生存，這一過程稱之為“傳代”

　　ATCC細(xì)胞實驗要點及說明：

　　1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

　　2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

　　3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

　　4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；

　　5．如果ATCC細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

　　ATCC細(xì)胞收到復(fù)蘇好的細(xì)胞的處理方法：

　　1. 先從外包裝盒拿出離心管，在離心管表面噴一層酒精，并小心去掉封口膜；

　　2. 將離心管中的細(xì)胞在超凈工作臺內(nèi)取出一部分進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)（詳見細(xì)胞凍存）。

　　3. 如細(xì)胞密度小于3×106/ml，可直接將離心管中的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T25瓶中，置于37°C，5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

　　4. 如ATCC細(xì)胞密度超過3×106/ml，操作步驟參照（細(xì)胞傳代）。